Hemoglobina NYU, wariant z łańcuchem delta,? 2? 212Lys

Niewielki składnik hemoglobiny (Hb) o właściwościach elektroforetycznych łańcucha a-wariantu Hb A2? napotkano w dwóch niepowiązanych rodzinach pochodzenia rosyjsko-żydowskiego. Ten niewielki składnik, oznaczony jako Hb NYU, okazał się wynikać z substytucji lizyny dla asparaginy przy a12. Potwierdziliśmy badania innych na temat hemoglobiny A2? wyizolowany z hemoglobiny niektórych afrykańskich osobników, wynika z zastąpienia normalnej glicyny w pozycji 16 przez argininę. Tak więc dla interpretacji częstości występowania wariantów (3 łańcucha w różnych populacjach dane...

Aktywowana przez naskórkowy hydrolizę fosfoinozytydów w hodowanych szczurzych wewnętrznych komórkach rdzeniowych zbierających kanaliki. Regulacja przez białko G, wapń i kinazę białkową C.

Epidermalny czynnik wzrostu (EGF) wykazuje specyficzne nasycalne wiązanie z hodowanymi wewnętrznymi rdzeniowymi komórkami kanalików hodowlanych szczura i stymuluje wytwarzanie trisfosfonianu inozytolu (IP3) przez te komórki w sposób zależny od dawki. Stymulacja EGF stymulowana przez IP3 jest wzmacniana przez GTP gamma s lub AIF4- i jest hamowana przez GDP beta lub toksynę krztuścową. Zmiany w zewnątrzkomórkowym Ca2 + nie mają wpływu na produkcję IP3 stymulowaną przez podstawną lub stymulowaną EGF. Podobnie, leczenie EGTA, które zmniejsza stężenie Ca2 + w cytozolu, nie daje...

Lokalizacja miejsca wiązania tkankowego aktywatora plazminogenu z fibryną.

Funkcjonalnie aktywne łańcuchy A i B oddzielono od dwułańcuchowej postaci rekombinowanego tkankowego aktywatora plazminogenu po łagodnej redukcji i alkilowaniu. Stwierdzono, że łańcuch A jest odpowiedzialny za wiązanie z lizyną-Sepharozą lub fibryną, a łańcuch B zawierał katalityczną aktywność tkankowego typu aktywatora plazminogenu. Znaczna redukcja dwułańcuchowego tkankowego aktywatora plazminogenu zniszczyła jednak zarówno aktywność wiążącą, jak i katalityczną. Fragment termolityczny, Fr. 1, z tkankowego aktywatora plazminogenu, który zawierał czynnik wzrostu ...

Badanie molekularne niedoboru fosforybozylotransferazy hipoksantyna-guanina u człowieka.

Scharakteryzowaliśmy 24 niespokrewnionych pacjentów z niedoborem enzymu, fosforybozylotransferazą hipoksantynowo-guaninową (HPRT), aby lepiej zrozumieć naturę i spektrum mutacji, które leżą u podstaw tej odziedziczonej prototypem choroby. Linie komórek limfoblastów pochodzące od każdego pacjenta analizowano na wielu poziomach molekularnych, w tym strukturze i funkcji resztkowego enzymu HPRT, informacyjnego RNA (mRNA) i genu. Nasze badania wykazują, co następuje: (a) co najmniej 16 z 24 pacjentów reprezentuje unikalne i niezależne mutacje w genie strukturalnym HPRT; (b) większ...

Najnowsze zdjęcia w galerii e-gastrolog:

Faza I: Badanie czynnika stymulującego wzrost kolonii granulocytów u pacjentów z przejściowym rakiem komórkowym nabłonka dróg moczowych.

Rekombinowany ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytów (rhG-CSF) podawano w dawce 1-60 mikrogramów / kg masy ciała 22 pacjentom z przejściowym rakiem komórek przed chemioterapią w ramach badania fazy I / II. U wszystkich pacjentów obserwowano zależne od dawki zwiększenie bezwzględnej liczby neutrofilów (ANC) o 1,8 - 12-krotnie. Dodatkowo, temu zwiększeniu w ANC towarzyszył wzrost alkalicznej fosfatazy leukocytów, markera tworzenia się wtórnych granulek. U sześciu z ośmiu analizowanych pacjentów zaobserwowano wzrost stosunku szpikowego szpiku do erytrocytów. Czasu 14...

Niewrażliwość na komórki B w szczurzym modelu cukrzycy insulinoniezależnej. Dowód na szybko odwracalny wpływ wcześniejszej hiperglikemii.

W perfundowanej trzustce u szczurów, u których stwierdzono cukrzycę po zastrzyku streptozotocyny (STZ) w wieku noworodkowym, odpowiedź insulinowa na 27 mM glukozy była znaczna, ale upośledzona. Na jego działanie nie wpływał alfa adrenergiczny bloker fentolaminy. Gdy dodano 27 mM mannoheptulozy jednocześnie z 27 mM glukozy, uwalnianie insuliny było zahamowane, ale mniej szybko niż w trzustkach szczurów bez cukrzycy. Po wprowadzeniu mannoheptulozy 15 minut po rozpoczęciu perfuzji z 27 mM glukozy, hamowanie było widoczne u szczurów bez cukrzycy, ale nie w STZ. U szczurów bez cukr...

Hamowanie in vitro zdolności hamowania elastazy surowicy przez reaktywne formy tlenu wytwarzane przez fagocytowanie leukocytów wielojądrzastych.

Ludzkie leukocyty polimorfojądrowe (PMN), fagocytujące opsonizowane kompleksy antygen-przeciwciało, wytwarzają ulegające dializie rodzaje aktywowanego tlenu, które są zdolne do częściowego hamowania zdolności hamowania elastazy (EIC) całej ludzkiej surowicy lub oczyszczonego ludzkiego inhibitora alfa1-proteinazy. EIC w surowicy był częściowo protologicznie chroniony przez dysmutazę ponadtlenkową, katalazę lub mannitol, co sugeruje, że odpowiedzialny za ten efekt może być rodnik hydroksylowy powstały w wyniku oddziaływania nadtlenku i nadtlenku wodoru. NaN3 także części...

Izolacja i częściowa charakterystyka białek wiążących Fc gamma ludzkich leukocytów.

Wyizolowaliśmy i częściowo scharakteryzowaliśmy trzy makrocząsteczki wiążące Fc z ludzkich leukocytów. Jednojądrzaste komórki od zdrowych osób i od pięciu pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową i neutrofilami od zdrowych dawców były znakowane izotopowo za pomocą 125I i laktoperoksydazy. Po solubilizacji komórek przez detergent makrocząsteczki wiążące gamma Fc oczyszczono za pomocą powtarzalnej chromatografii powinowactwa w różnych warunkach i analizowano za pomocą elektroforezy na żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS). Wyizolowano trzy zn...

Cyklosporyna A hamuje ekspresję ligandu CD40 w limfocytach T.

Ligand dla CD40 ulega ekspresji na aktywowanych limfocytach T i dostarcza zależne od kontaktu sygnały aktywacyjne do limfocytów B. Mechanizmy regulujące ekspresję genu ligandu CD40 są w dużej mierze nieznane. Optymalna ekspresja liganda CD40 wymagała aktywacji kinazy białkowej C i wzrostu wewnątrzkomórkowego stężenia wapnia. Ekspresja ligandu CD40 była hamowana przez wstępne traktowanie komórek T cyklosporyną A. Analogi cyklosporyny hamowały ekspresję ligandu CD40 z mocą odzwierciedlającą zdolność każdego związku do hamowania aktywności kalcyneuryny, co wskazuje, że...

Antysensowne oligonukleotydy interleukiny-6 hamują wzrost ludzkich linii komórek szpiczaka.

Wykazano, że IL-6 jest czynnikiem wzrostu plazmocytomy u myszy i uważa się, że odgrywa ona kluczową rolę w rozwoju ludzkiego szpiczaka mnogiego. Zbadaliśmy wymagania IL-6 dla wzrostu dwóch ludzkich linii komórek szpiczaka, U266 i RPMI 8226. Te linie komórkowe wydzielały niewielkie ilości IL-6 (20 U / ml) i zawierały mRNA IL-6. Receptory IL-6 były wykrywalne na powierzchni komórek złośliwych za pomocą immunofluorescencji. Przeciwciała przeciwko IL-6 nie zmieniały proliferacji tych komórek szpiczaka. Zmniejszenie zależne od dawki nastąpiło jednak w wychwycie [3H] -tymidyn...

Kontrola metabolizmu hemu za pomocą syntetycznych metaloporfiryn.

Badania z użyciem syntetycznych kompleksów metal-porfiryna, w których centralny atom żelaza w hemie zastąpiono innymi pierwiastkami, wskazują, że te analogi hemu, które nie mogą zostać enzymatycznie degradowane do pigmentów żółciowych, mają nowe właściwości biologiczne, które mogą mieć znaczną wartość kliniczną, jak również eksperymentalną. Badania takie ujawniły ważną rolę, jaką centralny atom metalu odgrywa w określaniu fizjologicznych i farmakologicznych właściwości kompleksów metal-porfiryna; i pokazali, że forma, w której zwierzęta i ludzie są nar...

Naturalne autoprzeciwciała mysie i konwencjonalne przeciwciała wykazują podobne poziomy antygenowej reaktywności krzyżowej.

Komórki B śledziony od myszy normalnych i autoimmunologicznych przenoszono do biorców xid kompatybilnych z MHC. Przeciwciała monoklonalne były wydzielane przez przeniesione komórki B w hodowlach fragmentów śledziony. Przeciwciała te oceniano pod kątem reaktywności i reaktywności krzyżowej wobec panelu sześciu autoantygenów i dwóch konwencjonalnych antygenów przy użyciu testu ELISA. Autoprzeciwciała i konwencjonalne przeciwciała wytwarzane w hodowlach fragmentów śledziony przez normalne DBA / 2 i autoimmunologiczne komórki NZB B wykazywały podobne stopnie antygenowej rea...

Utlenianie określonej metioniny w trombomodulinie przez aktywowane produkty neutrofili blokuje aktywność kofaktora. Potencjalny szybki mechanizm modulacji krzepnięcia.

Trombomodulina śródbłonka (TM) odgrywa kluczową rolę w hemostazie jako kofaktor do zależnego od trombiny tworzenia aktywowanego białka C, silnego antykoagulanta. Chloramina T, H2O2 lub kwas podchlorynowy wytworzony z H2O2 przez mieloperoksydazę szybko niszczą 75-90% aktywności kofaktora TM. Aktywowany PMN, pierwotne źródło biologicznych utleniaczy in vivo, również szybko dezaktywuje TM. Utlenianie TM przez PMN jest hamowane przez difenylenodjodon, inhibitor oksydazy NADPH. Zarówno Met291 jak i Met388 w sześciu domenach powtórzeń typu naskórkowego podobnego do czynnika wzros...

Podzbiór naturalnych komórek zabójczych jest indukowany przez kompleksy immunologiczne w celu wyświetlenia receptorów Fc dla IgE i IgA i wykazuje funkcję regulacji izotypowej.

Badano ekspresję receptorów Fc dla IgE (FcER) lub IgA (FcAR) na oczyszczonych komórkach NK (NK). Nie wykryto FcER + i kilku komórek NK FcAR + na świeżo rozdzielonych komórkach NK (NKH-1 +) od zdrowych dawców. Inkubacja komórek NK kompleksami immunologicznymi IgE-anty-IgE lub kompleksami immunologicznymi IgA-anty-IgA indukowała odpowiednio do 10 i 20% komórek FcER + lub FcAR +. Te FcR indukowano na CD3-, ale nie na komórkach CD3 + NKH-1 +. W przeciwieństwie do tego, komórki NK od pacjentów z różnymi dysgammaglobulinemiami nie mogą być indukowane do ekspresji FcER lub FcAR odp...

Ekspresja czynnika stymulującego kolonię makrofagów i genów c-fms w ludzkich ostrych komórkach białaczki mieloblastycznej.

Czynnik stymulujący wzrost kolonii makrofagów (CSF-1; M-CSF) jest czynnikiem wzrostu niezbędnym do wzrostu i różnicowania jednojądrzastych fagocytów. W oddziaływaniu CSF-1 pośredniczy wiązanie ze specyficznymi receptorami powierzchniowymi o wysokim powinowactwie kodowanymi przez gen c-fms. Ekspresję genu CSF-1 i c-fms badano w świeżych ludzkich ostrych mieloblastycznych komórkach białaczkowych za pomocą hybrydyzacji Northern blot przy użyciu sond cDNA. Transkrypty CSF-1 o wielkości 4,0 kb wykryto w 10 z 17 przypadków ostrej białaczki mieloblastycznej (AML), podczas gdy tran...

Rekombinowany ludzki czynnik martwicy nowotworów-alfa. Regulacja powinowactwa i funkcji receptora N-formylometionylolucyklofenyloalaniny na ludzkich neutrofilach.

Preinkubacja neutrofili rekombinowanym ludzkim czynnikiem martwicy nowotworów-alfa (rH TNF-alfa) wzmacniała późniejsze uwalnianie anionu ponadtlenkowego w odpowiedzi na różne stężenia N-formylometionylolucylofenyloalaniny (FMLP). Zwiększone wytwarzanie anionu ponadtlenkowego było widoczne przez 5 minut i osiągnęło plateau o 15 minut. Nie tylko całkowita ilość uwolnionego anionu ponadtlenkowego była większa, ale szybkość uwalniania została również zwiększona trzykrotnie przez rH TNF-alfa. Przeciwnie, rH TNF-alfa zmniejszało lub znosiło lokomocję neutrofili w agarozie ...

Zapalenie stawów wywołane u szczurów przez klonowane limfocyty T reagujące na prątki, ale nie na kolagen typu II.

Badaliśmy patogenezę adiuwantowego zapalenia stawów u szczurów, stosując długotrwałą linię komórkową limfocytów T, linię A2, która może wywoływać zapalenie wielostawowe i może być również stosowana do szczepienia szczurów przeciw adiuwantowemu zapaleniu stawów. Chociaż linia A2 została wybrana ze względu na swoją odpowiedź proliferacyjną na prątki, reagowała również na kolagen typu II. Aby wyjaśnić jego rolę w odpowiedzi na kolagen typu II i związek między artretogennością a szczepieniem, sklonowaliśmy A2 i wybraliśmy sublinę A2b. Obecnie informujemy,...

Wykorzystanie hodowanych ludzkich komórek limfoidalnych do wykrywania uczulenia humoralnego u potencjalnych biorców przeszczepów nerek.

Potencjalni biorcy przeszczepów nerki byli testowani pod kątem limfocytotoksyczności; z nich wybraliśmy 102 surowice pozbawione przeciwciał cytotoksycznych przeciwko limfocytom obwodowym z co najmniej 80 niespokrewnionych osób. W celu wykrycia uczulenia humoralnego, poddaliśmy je reakcji z 17 hodowanymi ludzkimi limfocytowymi liniami komórkowymi mającymi różne fenotypy HL-A. Przeciwciała cytotoksyczne reagujące z tymi hodowanymi komórkami zostały teraz wykryte w niektórych surowicach. Przeciwciała te nie były skierowane przeciwko antygenom HL-A, ale pośredniczyły w lizie do...

Oporność melanowskich eliptocytów (owalocytów) na inwazję pasożytów Plasmodium knowlesi i Plasmodium falciparum in vitro.

Erytrocyty od ludzi z eliptptocytami melanezyjnymi są oporne na inwazję przez Plasmodium falciparum in vitro, a dane epidemiologiczne sugerują, że mogą być oporne na P. vivax i P. malariae. Zbadaliśmy zdolność merozoitów P. knowlesi do inwazji melanowskich eliptocytów in vitro jako definitywnego sposobu badania tych komórek pod kątem odporności na inwazję przez gatunki malaryczne o różnych wymaganiach receptorowych. Melanezyjne eliptocyty były wysoce oporne na inwazję merozoitów P. knowlesi, co wskazuje, że oporność związana z tym wariantem erytrocytów leży na poziomi...

Wpływ zmienności całkowitego spożycia energii i składu diety na regulację lipolizy komórek tłuszczowych u osób o idealnej wadze.

Utrzymujące wagę, bogate w tłuszcz, "ostrożne", bogate w węglowodany, a także dietę o obniżonej energii (300 kcal / d) były karmione kolejno przez 7 d do 12 zdrowych mężczyzn o idealnej masie ciała w warunkach oddziału metabolicznego. Pod koniec każdego okresu izolowane komórki tłuszczowe przygotowywano z podskórnej tkanki tłuszczowej brzusznej i inkubowano in vitro w nieobecności lub obecności deaminazy adenozyny, samodzielnie lub w połączeniu z różnymi hormonami i środkami lipolitycznymi lub antylipolitycznymi. Różnice w całkowitym spożyciu energii i sk...

Szybki klirens strukturalnego izomeru bilirubiny podczas fototerapii.

Podczas fototerapii żółtaczki noworodków bilirubina jest przekształcana w różne fotoprodukty. Ustalenie względnego znaczenia tych fotoproduktów dla eliminacji bilirubiny wymaga znajomości tempa ich wydalania. Mierzono szybkość, z jaką strukturalny izomer bilirubiny, lumirubiny, zniknął z surowicy dziewięciu zgorzkniałych wcześniaków po zaprzestaniu fototerapii. U wszystkich badanych pacjentów zmniejszenie stężenia lumirubiny w surowicy można było oszacować na podstawie równania wskaźnika pierwszego rzędu o okresie półtrwania wynoszącym od 80 do 158 minut. Ta szyb...

Ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytowo-makrofagowe indukuje ekspresję genu czynnika martwicy nowotworu przez linię komórkową U937 i normalne ludzkie monocyty.

Czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów i makrofagów (GM-CSF) wywiera głęboki wpływ na proliferację, różnicowanie i funkcję efektorową komórek linii mieloidalnej. W przeciwieństwie do jego wpływu stymulującego wzrost na normalne szpikowate komórki progenitorowe, stwierdziliśmy, że GM-CSF nieoczekiwanie hamuje wzrost kolonii komórek U937 w hodowli agarowej. Ponadto stwierdzono, że pożywka uwarunkowana przez rekombinowane komórki U937 traktowane GM-CSF (rGM-CSF) wywiera hamujący wpływ na dalszy wzrost kolonii U937, co częściowo wynikało z obecności czynnika ma...

Naskórkowa substancja podobna do czynnika wzrostu, substancja gojenia się rogówki w łzach myszy.

Zidentyfikowaliśmy obecność przypuszczalnej substancji leczniczej do gojenia się rogówki w mysich łzach, która ma rozmiar cząsteczkowy i właściwości immunologiczne podobne do właściwości naskórkowego czynnika wzrostu (EGF). Substancja była zdolna do wiązania się z receptorami EGF w mysich komórkach miąższowych i wiązanie to było hamowane przez surowicę anty-EGF. Stężenie substancji podobnej do EGF w łzach samców i samic myszy oszacowano odpowiednio na 79,3 +/- 7,0 (SD) ng / ml i 76,5 +/- 8,1 (SD) ng / ml, za pomocą testu radioimmunologicznego EGF. Usunięcie gruczo...

Mutacja genu fumarase u dwojga rodzeństwa z postępującą encefalopatią i niedoborem fumarazy.

Zgłaszamy wrodzony błąd cyklu kwasu trójkarboksylowego, niedobór fumarazy, u dwojga rodzeństwa urodzonego przez rodziców pierwszego kuzyna. Przedstawiono postępującą encefalopatię, dystonię, leukopenię i neutropenię. Zwiększenie mleczanu w płynie mózgowo-rdzeniowym i wysokie wydalanie fumaranu z moczem doprowadziło nas do zbadania aktywności łańcucha oddechowego i cyklu Krebsa, a także do ostatecznego zidentyfikowania niedoboru fumaraz u tych dwojga dzieci. Niedobór był głęboki i obecny we wszystkich badanych tkankach, wpływając w ten sam sposób na izoenzymy fumara...

Sn-protoporfiryna hamuje wywołaną chemicznie eksperymentalną porfirię wątrobową. Potencjalne implikacje kliniczne.

Zdolność Sn (cyny) -protoporfiryny do hamowania indukcji syntazy wątrobowej delta-aminolewulinianu (ALA) przez alliloizopropyloacetamid (AIA) badano u dorosłego szczura. Dawki Sn-protoporfiryny wynoszące 1, 10 i 50 mumoli / kg masy ciała powodowały zmniejszenie indukowanej przez AIA wątrobowej aktywności syntazy ALA, odpowiednio, o 32, 52 i 60%, w porównaniu ze szczurami leczonymi samą AIA; hamowanie syntazy ALA nie było bezpośrednim efektem Sn-protoporfiryny. To zahamowanie aktywności enzymatycznej w wątrobie znalazło odzwierciedlenie w równoczesnym zmniejszeniu wydalania z m...

Różnicowy wpływ różnych izoform płytkowego czynnika wzrostu na chemotaksję fibroblastów, monocytów i granulocytów.

Zbadano aktywności chemotaktyczne trzech różnych izoform płytkopochodnego czynnika wzrostu (PDGF) na fibroblastach, monocytach i granulocytach pochodzenia ludzkiego. PDGF-AB i PDGF-BB indukowały silne, zależne od dawki odpowiedzi zarówno na fibroblasty jak i monocyty, podczas gdy PDGF-AA nie stymulował chemotaksji tych typów komórek. Zamiast tego, PDGF-AA hamował chemotaktyczną aktywność PDGF-AB i PDGF-BB na fibroblastach i monocytach. Jednak PDGF-AA nie był w stanie blokować chemotaksji monocytów indukowanej przez FMLP. Natomiast w granulocytach otrzymano zależne od dawki od...

Analiza biochemiczna tkanki kalusa w osteogenezie niedoskonałości typu IV. Dowody przemijającej supremodyfikacji w kolagenie typu I i III.

Przeanalizowaliśmy tkankę i komórki ze stacjonarnego i szybko rosnącego hiperplastycznego kalusa od pacjenta z osteogenezą niedoskonałości (OI) typu IV i porównaliśmy wyniki z wynikami zwartej kości i fibroblastów skóry o dopasowanym wiekiem schemacie kontrolnym. Zawartość kolagenu i białka w komórce była niska w tkankach kalusa, a kolagen I i III ulegały nadmiernej modyfikacji, o czym świadczy podwyższony poziom hydroksylizyny. Stopień hydroksylacji lizylu był najwyższy w tych regionach, które wyglądały na niedojrzałych w wyniku badania histologicznego. Hydroksylacj...

Immunizacja antygenem powierzchniowym merozoitu Plasmodium falciparum indukuje częściową odporność u małp.

Małpy Saimiri immunizowane polipeptydem merozoitu Plasmodium falciparum o masie cząsteczkowej 41 kD są odporne na infekcję prowokowaną krwią, która indukuje piorunującą infekcję u kontrolnych małp. Surowice immunizowanych małp reagowały, jak pokazano techniką pośredniej immunofluorescencji, z wierzchołkową częścią merozoitów z pięciu izolatów lub klonów P. falciparum. To, czy immunogen był rozpuszczony w niejonowym detergencie (NP-40), czy w dodecylosiarczanie sodu (SDS) miało znaczący wpływ na poziom ochrony u immunizowanych małp. Tak więc małpy immunizowane ant...

Nieprawidłowy metabolizm miedzi i niedobór aktywności oksydazy lizylowej w dziedzicznym zaburzeniu tkanki łącznej.

Nieprawidłowości biochemiczne badano u dwóch braci z przeponami pęcherza moczowego, przepuklin pachwinowych, nieznacznym zwiotczeniem skóry i nadwzrocznością oraz nieprawidłowościami szkieletowymi, w tym egzostozami potylicy. Aktywność oksydazy lizylowej była niska w pożywce hodowanych fibroblastów skóry, czemu towarzyszy zmniejszona konwersja nowo syntezowanego kolagenu do postaci rozpuszczalnej. Stężenie miedzi było znacznie podwyższone w hodowanych fibroblastach skóry, ale zmniejszyło się w surowicy i włosach. Poziomy cerulophasmin w surowicy również były niskie. U...

Hiperkalcemia wywołana arotynoidem u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Nowy model do badania resorpcji kości in vivo.

Model stymulowanej resorpcji kości opracowano przy użyciu syntetycznego retinoidu u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Retinoidy spowodowały wzrost resorpcji kości i liczbę kręgowych osteoklastów podokostnowych. Wynikowy wzrost stężenia Ca w osoczu można wykorzystać jako łatwo mierzony wskaźnik resorpcji kości. Trzy bisfosfoniany powodowały zależne od dawki zapobieganie i odwracanie hiperkalcemii wywołanej retinoidami. Ich moc była podobna do poprzednio uzyskiwanej przez histomorfometrię. Napromieniowanie (600 rad) szczurów zapobiegło hiperkalcemii, ale nie uda...

Angiotensynogen jako czynnik ryzyka pierwotnego nadciśnienia tętniczego w Japonii.

Popularny molekularny wariant angiotensynogenu (AGT), prekursora silnego wazoaktywnego hormonu angiotensyny II, został obciążony jako marker genetycznej predyspozycji do nadciśnienia tętniczego u osób rasy kaukaskiej (Jeunemaitre, X., F. Soubrier, YV Kotelevtsev, RP Lifton , CS Williams, A. Charru, SC Hunt, PN Hopkins, RR Williams, JM Lalouel i P. Corvol., 1992. Celi 71: 169-180). Obecnie pokazujemy, że ten sam wariant, T235, jest związany z nadciśnieniem tętniczym pierwotnym u japońskich pacjentów. Obserwacja tego związku w odrębnej, homogenicznej populacji etnicznej dodatkowo p...

Autoprzeciwciało z komórek T antyhelpera w nabytej agammaglobulinemii.

Pacjent z nabytą agammaglobulinemią miał antyhelpowy czynnik limfocytów T, który został zidentyfikowany jako immunoglobulina z klasy IgG. Czynnik specyficznie związany z podzbiorem komórki TH2-T i, w obecności dopełniacza, zlikwidował efekt pomocniczy normalnych limfocytów T. Przeciwciało limfocytów T antyhelper poprzedziło kilkuletnie pojawienie się limfocytów T supresyjnych TH2 + Ia +, w którym to czasie przebieg kliniczny gwałtownie się pogarszał. Plazmafereza skutkowała limfocytozą i ponownym pojawieniem się funkcjonalnie nienaruszonej populacji limfocytów T pomocn...

Regulacja tworzenia hemoglobiny AIc w ludzkich erytrocytach in vitro. Wpływ czynników fizjologicznych innych niż glukoza.

Tworzenie się hemoglobiny AIc badano w nienaruszonym ludzkim erytrocytach in vitro. Opracowano zadowalające metody utrzymywania erytrocytów w warunkach fizjologicznych przez ponad 8 dni z hemolizą poniżej 10%. Poziom hemoglobiny AIc oznaczano chromatograficznie na hemolizatach erytrocytów po usunięciu odwracalnych składników przez inkubację przez 6 hw 37 stopniach C. Stężenie hemoglobiny AIc wzrastało liniowo z czasem podczas 8 d inkubacji. Szybkość tworzenia hemoglobiny AIc wzrastała liniowo wraz ze wzrostem stężenia glukozy z 40 do 1000 mg / dl. Deoksyhemoglobina była glik...

Nieprawidłowy łańcuch alfa 2 w kolagenie typu I od pacjenta z postacią osteogenezy imperfecta.

Fibroblasty skóry w hodowli od kobiety o łagodnej do umiarkowanej postaci niedoskonałości osteogenezy syntetyzują dwa rodzaje prokolagenu typu alfa 2 typu I. Jeden łańcuch jest normalny. Nieprawidłowy łańcuch ma nieco szybszą ruchliwość niż normalna podczas elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu. Analiza peptydów z bromocyjanem łańcucha pro-alfa, łańcucha alfa i ssaczy produktów rozszczepiania kolagenazy w łańcuchach pro-alfa i alfa wskazuje, że nieprawidłowość jest ograniczona do fragmentu CB4 alfa (I) i jest zgodna z utratą krótkiego odc...

Biosyntetyczne i strukturalne badania białek o ciężkim łańcuchu

Nowe białko o ciężkim łańcuchu (? HCD-JM) zostało scharakteryzowane za pomocą kryteriów antygenowych i strukturalnych. Białko należy do podklasy IgG3 i jest blisko spokrewnione z fragmentem Fc immunoglobulin G3. Dominującym N-końcowym aminokwasem tego białka jest kwas glutaminowy w postaci niecyklizowanej, a inny? HCD jest glicyną. Badania N-końcowych peptydów wskazują, że N-końcowa część łańcucha ciężkiego polipeptydu A3 jest nieobecna w JHCD-JM. Wyniki te wykluczają proces normalnej inicjacji ciężkiego łańcucha i dużą delecję regionu Fd jako odpowiedzialnego...

Rola centralnych adrenoceptorów alfa-1 w narkolepsji psów.

Rola centralnych receptorów adrenergicznych alfa-1 w katapleksji została zbadana u genetycznie narkoleptycznych pinczerów Dobermana. Leczenie narkoleptycznych psów za pomocą 25-600 mikrogramów / kg prazosyny, selektywnego blokera receptora alfa-1 adrenergicznego, zaostrzało katapleksję, podczas gdy leczenie agonistą alfa-1, metoksaminą, łagodziło go. Kolejne badania wykazały, że korzystny wpływ klasycznego leczenia narkolepsji u ludzi (amfetaminy i trójcykliczne leki przeciwdepresyjne) jest antagonizowany przez prazosin, co sugeruje, że leki te są aktywne poprzez pośrednią ...

Śmierci komórkowej śledziony limfocytów B jest zapobiegane przez uwalnianie tlenku azotu poprzez mechanizmy wiążące się z utrzymującymi się poziomami Bcl-2.

Inkubacja dojrzałych limfocytów B hodowanych ex vivo w obecności tlenku azotu lub substancji będących donorami tlenku azotu opóźnia zaprogramowaną śmierć komórki, co określa się przez pojawienie się drabiny DNA w elektroforezie w żelu agarozowym lub przez analizę metodą cytometrii przepływowej DNA. Tlenek azotu również ratuje limfocyty B przed apoptozą indukowaną antygenem, ale nie zapewnia sygnału kostymulującego, który przekształca sygnał wywołany przez antygen w odpowiedź proliferacyjną. Ochronne działanie tlenku azotu przed programowaną śmiercią komórkow...

Obecność antygenu nie będącego HLA B w pacjentach z gorączką reumatyczną i ich rodzinami określonymi przez przeciwciało monoklonalne.

Wielu badaczy podejrzewało, że istnieje genetyczna predyspozycja do gorączki reumatycznej (RF). W tym kontekście opracowaliśmy ostatnio serię przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko komórkom B otrzymanym od pacjentów z RF, z których jeden, oznaczony D8 / 17, identyfikuje antygen komórek B obecny u 100% wszystkich badanych pacjentów z RF. Podczas gdy najwyższy odsetek komórek pozytywnych był eksponowany przez probioty RF (33,5% +/- SE), odsetek komórek nienarażonego rodzeństwa i rodziców wynosił odpowiednio 14,6 i 13%. Procent komórek dodatnich w probantach APSGN,...

Molekularna charakterystyka somatycznie zmutowanego przeciwciała anty-DNA niosącego dwa ogólnoustrojowe idiotypy tocznia rumieniowatego.

Opisujemy charakterystykę molekularną 2A4, przeciwciała IgG wiążącego DNA, zawierającego idiotypy 3I i F4, które są związane z przeciwciałami anty-DNA w surowicy pacjentów z układowym toczniem rumieniowatym (SLE). Przeciwciało jest wytwarzane przez transformowaną EBV linię komórek B pochodzącą od pacjenta ze szpiczakiem mnogim, którego białko szpiczaka jest również reaktywną immunoglobuliną wiążącą IgG, reaktywną względem 3I, F4, chociaż samo przeciwciało 2A4 samo w sobie nie reprezentuje szpiczaka. białko. Łańcuch ciężki 2A4 jest kodowany przez gen VH4, f...

Rodzinny toczeń rumieniowaty układowy. Obecność krzyżowego reaktywnego idiotypu u zdrowych członków rodziny.

Surowice 27 członków 3 ludzkich krewnych z rodzinnym układowym toczniem rumieniowatym (SLE) badano pod kątem ekspresji krzyżowo reaktywnego idiotypu obecnego na przeciwciałach anty-DNA pacjentów z SLE. W teście radioimmunologicznym, próbki surowicy od 6 z 8 pacjentów z SLE i 15 z 19 członków rodziny miały wysoką reaktywność z antybiotykiem, 3I. Ogniskowanie izoelektryczne i analiza Western blot pasm 3I reaktywnych ujawniły dwa wzorce reaktywności: albo wzór pasm obecnych w pH 5-7, albo pasm obecnych w pH 5-7 z dodatkowymi pasmami obecnymi przy pH 7-8,5. Stwierdzono, że prą...

Genetyczne determinanty masy kostnej u dorosłych. Podwójne badanie.

Względne znaczenie czynników genetycznych w określaniu masy kostnej w różnych częściach szkieletu jest słabo poznane. Kręgosłup lędźwiowy i gęstość mineralną kości bliższej kości udowej oraz mineralną zawartość kości przedramienia mierzono metodą absorpcjometrii fotonów w 38 bliźniaczych parach monozygotycznych i 27 dizygotycznych. Gęstość mineralna kości była istotnie silniej skorelowana w przypadku bliźniąt jednojajowych niż bliźniąt dwuzygotycznych w przypadku kręgosłupa i bliższej części kości udowej oraz przedramienia przedsezonusowych par bliźni...

Zmieniona ekspresja receptora C3b erytrocytu, kompleksy immunologiczne i aktywacja dopełniacza u homoseksualnych mężczyzn w różnych grupach ryzyka dla nabytego zespołu niedoboru odporności.

Badaliśmy poziomy receptorów erytrocytarnych C3b (E-CR1) i skorelowaliśmy je z poziomem krążących kompleksów immunologicznych (CIC) i aktywacją dopełniacza u pacjentów z ryzykiem zespołu nabytego niedoboru odporności (AIDS). Znaczącą redukcję stwierdzono u pacjentów z AIDS (185 +/- 93 CR1 / komórkę), zespołem związanym z AIDS i uogólnioną limfadenopatią, podczas gdy zdrowi homoseksualiści lub normalni kontrolerzy mieli 434 +/- 193 i 509 +/- 140 CR1 / komórka, odpowiednio (P mniej niż 0,001). Badania rodzinne wskazują, że ta wada została nabyta. Redukcja E-CR1 była...

Retargetowanie komórek przez bispecyficzne przeciwciała monoklonalne. Dowód pominięcia wrażliwości śródpiersia na lizę komórek w czerniaku ludzkim.

Nieleczność wewnątrzmaciczna pod względem podatności na lizę cytotoksycznych limfocytów T (CTL) stanowi główną przeszkodę w immunoterapii adoptywnej nowotworów. Aby pokonać heterogenność obserwowaną pod względem podatności komórek docelowych na lizę komórkową, w tym badaniu wykorzystano dwa oczyszczone bispecyficzne przeciwciała monoklonalne (bsmAbs), które rozpoznają cząsteczki ekspresjonowane przez cytotoksyczne komórki efektorowe (cząsteczki receptora CD3 i IgG Fc), jak również jako jeden wysokocząsteczkowy antygen związany z czerniakiem (HMW-MAA). Zdolność...

Tłumaczenie i stabilność mRNA ludzkiej globiny w oocytach Xenopus.

Ludzki matrycowy RNA (mRNA) przygotowany z komórek erytroidalnych pacjentów z niedokrwistością sierpowatych komórek został przetłumaczony na oocyty Xenopus laevis. Dodanie heminy do wstrzykniętego mRNA powoduje wzrost całkowitej syntezy globiny i stosunek alfa do syntezy beta-globiny (stosunek alfa / beta) do zbliżenia się do jedności. Aby określić wpływ długości segmentu poli (A) na stabilność mRNA ludzkiej globiny, mRNA 10S globiny frakcjonowano na frakcje poli (A) -pochodne przez chromatografię kolumnową oligo (dT) -celelozy. Gdy oocyty są wstrzykiwane w każdą z tych...

Zaawansowane produkty końcowe glikozylacji blokują antyproliferacyjny efekt tlenku azotu. Rola w powikłaniach naczyniowych i nerkowych cukrzycy.

Zaawansowane produkty końcowe glikozylacji (AGE) gromadzą się na długowiecznych białkach tkankowych, takich jak kolagen błony podstawnej i są związane z wieloma długotrwałymi powikłaniami cukrzycy. Produkty te pochodzą z pochodnej Schiffa i produktów Amadori bazujących na glukozie, ale przechodzą szereg złożonych reakcji rearanżacji, tworząc ostatecznie związane z białkami, fluorescencyjne heterocykle. AGE mogą reagować i chemicznie inaktywować tlenek azotu (NO), silny czynnik rozszerzający naczynia krwionośne śródbłonka i czynnik antyproliferacyjny. Ponieważ prol...

Rola grasicy w indukcji i przeniesieniu szczepień przeciwko adiuwantowemu zapaleniu stawów za pomocą linii limfocytów T u szczurów.

Adjuwantowe zapalenie stawów jest eksperymentalną chorobą szczurów indukowaną przez immunizację do antygenów Mycobacterium tuberculosis. Nasza obserwacja, że zapalenie stawów może być indukowane na napromieniowanych szczurach przez linię A2 limfocytów T przy braku antygenów prątkowych sugeruje, że adiuwantowe zapalenie stawów jest chorobą autoimmunologiczną. Co więcej, linia A2 mogłaby być użyta do szczepienia szczurów, które nie zostały poddane napromieniowaniu, przeciwko późniejszej indukcji adiuwantowego zapalenia stawów przez aktywną immunizację na prątki. W...

Wzmocnienie wydzielania zewnątrzwydzielniczego indukowanego cholecystokininą zarówno przez egzogenną, jak i endogenną insulinę w izolowanych i perfundowanych trzustkach szczurzych.

Stosując wyizolowany perfundowany preparat trzustki na szczurach, badano wzajemne zależności między częściami trzustki wewnątrzwydzielniczej i zewnątrzwydzielniczej. Dodanie egzogennej szczurzej insuliny (1-20 mU / ml) do perfundującego roztworu potwierdziło działanie cholecystokininy (CCK) (1 mU / ml), aby zwiększyć przepływ soku trzustkowego i uwolnienie enzymu, amylazy. Podniesienie stężenia glukozy w perfundowanym roztworze z 2,5 do 17,5 mM zarówno zwiększyło endogenne uwalnianie insuliny, jak i potwierdziło wywoływaną przez CCK zewnątrzwydzielniczą odpowiedź wydzi...

Dowody na czynnik pochodzenia mysich komórek mysich, który stymuluje proliferację limfocytów.

Funkcje mezangium kłębuszkowego są obsługiwane przez co najmniej dwie populacje komórek - komórkę zawierającą mikrowłókna regulujące przepływ krwi oraz komórkę fagocytarną niosącą determinanty Ia i receptory Fc. Dostarczamy dowodów na to, że mysie komórki mezangialne (niosące mikrofilamenty) wytwarzają czynnik (czynniki), który stymuluje proliferację komórek śledziony. Wydaje się, że czynnik (czynniki) działa poprzez monocyty / makrofagi, ponieważ jego aktywność stymulująca jest znoszona przez wcześniejsze zubożenie populacji komórek jednojądrzastych odpow...

Nowy zespół limfoproliferacyjny / autoimmunologiczny przypominający mysią chorobę lpr / gld.

U myszy dwa różne autosomalnie recesywne geny lpr i gld mogą indukować zespół charakteryzujący się tworzeniem autoprzeciwciał i postępującą akumulacją niezwykłej populacji limfocytów T CD4-CD8- w obwodowej tkance limfatycznej. Ten fenotyp nie odzwierciedla dokładnie żadnej ludzkiej choroby. W raporcie tym opisujemy dwóch pacjentów z postępującym zaburzeniem limfoproliferacyjnym związanym z autoimmunizacją. Krew obwodowa i węzły chłonne tych pacjentów zawierały dużą liczbę nietypowej populacji limfocytów T CD4-CD8-. Te limfocyty T CD4-CD8-T wyrażają markery pow...

Stabilne rodniki nitroksydowe chronią kardiomiocyty przed uszkodzeniami oksydacyjnymi.

Ochronne działanie stabilnych rodników nitroksydowych na uszkodzenia oksydacyjne badano za pomocą hodowli kardiomiocytów otrzymanych od nowonarodzonych szczurów. Jednowarstwowe kardiomiocyty poddano ekspozycji na H2O2 i określono wpływ na spontaniczne pobudzenie i wyciek LDH. Nadtlenek wodoru nieodwracalnie blokował rytmiczne bicie i powodował znaczące uszkodzenie błony, jak wykazano przez uwalnianie LDH. Urazowi zapobiegała katalaza, która usuwa H2O2 i przepuszczalne dla komórek czynniki chelatujące metal, takie jak desferrioksamina lub bipirydyna. Natomiast odczynniki, które ...

Tamoksyfen blokuje kanały chlorkowe. Możliwy mechanizm powstawania zaćmy.

Tamoksyfen jest antyestrogenem często stosowanym w leczeniu raka piersi i obecnie jest oceniany jako profilaktyczny dla osób z wysokim ryzykiem rozwoju nowotworów. Stwierdziliśmy, że tamoksyfen i jego pochodne są blokerami o wysokim powinowactwie do określonych kanałów chlorkowych. Ta blokada wydaje się być niezależna od interakcji tamoksyfenu z receptorem estrogenu i dlatego odzwierciedla alternatywny cel komórkowy. Jednym z klinicznych skutków ubocznych tamoksyfenu jest upośledzenie widzenia i zaćma. Pokazano, że kanały chlorkowe w soczewce oka są niezbędne do utrzymania ...

Zależność między fenotypem apolipoproteiny (a), stężeniem lipoproteiny (a) w osoczu i funkcją receptora lipoprotein o małej gęstości w rodzinnej hipercholesterolemii z powodu mutacji pro664 ---- leu w genie receptora LDL.

W dużej grupie 66 osób 22 zidentyfikowano jako heterozygotyczne, a 3 jako homozygotyczne pod względem mutacji (pro664 ---- leu) w genie receptora LDL, co prowadzi do rodzinnej hipercholesterolemii (FH). Wszystkie heterozygoty miały podwyższony poziom całkowitego cholesterolu w osoczu i cholesterolu lipoprotein niskiej gęstości, ale były wyjątkowo wolne od przedwczesnej choroby wieńcowej. Oznaczenie stężenia apolipoproteiny (a) (apo (a)) i lipoproteiny (a) (Lp (a)) w osoczu wykazało, że w wielu przypadkach u osób z różnymi fenotypami apo (a) nie było różnicy w Lp w osoczu (...

Interleukina-10 moduluje ekspresję genów kolagenu typu I i metaloproteazy macierzy w hodowanych fibroblastach ludzkiej skóry.

IL-10, pierwotnie wyizolowana z komórek T pomocniczych myszy, jest cytokiną o funkcjach regulacyjnych na wielu interleukinach. W tym badaniu pokazujemy, że rekombinowana ludzka IL-10 wpływa na ekspresję kilku genów zaangażowanych w syntezę macierzy pozakomórkowej i przebudowę w ludzkich kulturach fibroblastów skóry. Jak oceniano w analizach Northern blot, ekspresja genów kolagenu typu I była obniżona, podczas gdy ekspresja genu kolagenazy i genu stromelizyny była znacznie wzmocniona przez IL-10. Nie stwierdzono wpływu na tkankowy inhibitor metaloproteaz poziomów mRNA. Przejś...

Wydzielanie lipazy lipoproteinowej przez ludzkie makrofagi pochodzące z monocytów.

Ludzkie makrofagi pochodzące z monocytów w hodowli wytwarzały lipazę lipoproteinową. Chociaż świeżo wyizolowane monocyty krwi nie wydzielały znacznej aktywności lipazy, 1 d w hodowli była wystarczająca do wywołania mierzalnej produkcji enzymu. W ciągu 3 tygodni w hodowli maksymalna aktywność została osiągnięta po 7 dniach. Przez cały czas pożywka hodowlana zawierała więcej aktywności enzymatycznej niż eluat surowicy-heparyny lub ekstrakt detergentowy warstwy komórkowej. Aktywność lipazy stymulowano surowicą i hamowano przez wstępną inkubację z surowicą odporno...

Rola białek nośnikowych w surowicy w metabolizmie obwodowym i rozmieszczeniu tkankowym hormonów tarczycy w rodzinnej hipertoksyksymii dysbbuminowej i wrodzonym podwyższeniu globuliny wiążącej tyroksynę.

Aby zbadać rolę globuliny wiążącej tyroksynę (TBG) i albuminy w dostępności hormonów tarczycy do tkanek obwodowych, wykonano kompleksowe badania kinetyczne tyroksyny (T4) i trijodotyroniny (T3) u ośmiu osób z rodzinną hipertoksyksemią dysbbuminową (FDH) , u czterech osób z odziedziczonym nadmiarem TBG iu 15 osób zdrowych. U osób z wysokim odsetkiem TBG redukcja klirensu osoczowego T4 i T3 (odpowiednio o 51% i 54%) wiązała się z normalną codzienną produkcją; Objętości dystrybucji T4 i T3 zostały znacznie zmniejszone. U osób z FDH klirens T4 był mniej zmniejszony (o 3...

Opróżnianie żołądka i wydzielanie w zespole Zollingera-Ellisona.

Opróżnianie żołądka i wydzielanie, a także objętość i skład soku żołądkowego określono jednocześnie u trzech pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu siedmiu zdrowych osób. Nadciśnienie w żołądku obserwowano u pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu osób zdrowych otrzymujących pentagastrynę. W przeciwieństwie do tego frakcja zawartości żołądka opróżniana na minutę (ułamkowa stopa opróżniania) była zwiększona u pacjentów Zollingera-Ellisona i niezmieniona lub zmniejszona u zdrowych osób otrzymujących pentagastrynę. Zwiększona ułamkowa stopa o...

Relaks anafilaktyczny bazofilowej aktywności podobnej do kalikreiny. II. Pośrednik natychmiastowych reakcji nadwrażliwości.

W tym raporcie opisano uwalnianie immunologiczne nowego mediatora z ludzkich leukocytów obwodowych, aktywność podobną do kalafoniny bazowej (BK-A). Proces uwalniania inicjowany jest przez oddziaływanie antygenu na anty-IgE z komórkową IgE i wydaje się być podobny w mechanizmie do relazy histaminy i innych mediatorów bezpośredniej reakcji nadwrażliwości. Relacje dawka-odpowiedź i kinetyka uwalniania histaminy i BK-A z leukocytów obwodowych prowokowanych antygenem są podobne. Reakcja BK-A zależy od wapnia i temperatury, wymaga energii metabolicznej i jest kontrolowana przez inte...

Lokalizacja regionów wiążących mysiego monoklonalnego przeciwciała anty-czynnik VIII i ludzkiego alloprzeciwciała czynnika VIII, które hamują aktywność prokoagulacyjną czynnika VIII, do reszt aminokwasowych treoniny351-seryny 365 czynnika VIII

Zlokalizowaliśmy region wiążący wcześniej opisanego przeciwciała monoklonalnego anty-czynnik VIII (FVIII) hamującego (C5) do reszt aminokwasowych Thr351-Ser365 z 54-kD wytworzonego trombiny fragmentu ciężkiego łańcucha FVIII. Syntetyczne peptydy FVIII badano pod kątem zdolności do konkurencyjnego hamowania wiązania C5 do FVIII w systemie ELISA. Syntetyczny peptyd FVIII Thr351-Ser365 blokował wiązanie C5 z FVIII w sposób zależny od dawki w tym układzie. Dwa inne syntetyczne peptydy FVIII, Asn340-Glu354 i Glu342-Asp356, które częściowo zachodziły na Thr351-Ser365, równie...