Relaks anafilaktyczny bazofilowej aktywności podobnej do kalikreiny. II. Pośrednik natychmiastowych reakcji nadwrażliwości.

W tym raporcie opisano uwalnianie immunologiczne nowego mediatora z ludzkich leukocytów obwodowych, aktywność podobną do kalafoniny bazowej (BK-A). Proces uwalniania inicjowany jest przez oddziaływanie antygenu na anty-IgE z komórkową IgE i wydaje się być podobny w mechanizmie do relazy histaminy i innych mediatorów bezpośredniej reakcji nadwrażliwości. Relacje dawka-odpowiedź i kinetyka uwalniania histaminy i BK-A z leukocytów obwodowych prowokowanych antygenem są podobne. Reakcja BK-A zależy od wapnia i temperatury, wymaga energii metabolicznej i jest kontrolowana przez interakcje hormon-receptor,...

Stężenie interleukiny 6 w surowicy, silny czynnik wzrostu komórek szpiczaka, jako odzwierciedlenie ciężkości choroby w dysracjach komórek plazmatycznych.

Stosując specyficzny i bardzo czuły test biologiczny (1 pg = 1 U), badaliśmy obecność IL-6, silnego czynnika wzrostu komórek szpiczaka, w surowicach 131 osobników z dyskrazjami komórek plazmatycznych. 22 miało gammapatię monoklonalną o nieokreślonym znaczeniu (MGUS), 13 miało tlący się szpiczak (SMM), 85 miało jawny szpiczak mnogi (MM), a 11 miało białaczkę z komórek plazmatycznych (PCL). Znaczące poziomy IL-6 w surowicy wykryto tylko w 3% grupy MGUS / SMM, ale w 35% jawnej grupy MM i 100% grupy PCL. Podczas jawnego MM, IL-6 wykryto u 37% pacjentów w momencie rozpoznania, 13% u osób ze stabiln...

Kompleks końcowy dopełniacza C5b-9 stymuluje mitogenezę w komórkach 3T3.

Kompleks dopełniacza błony (MAC) może indukować odwracalne zmiany w przepuszczalności błony komórkowej, powodując znaczące, lecz przejściowe wewnątrzkomórkowe zmiany jonowe przy braku lizy komórek. Ponieważ strumienie jonów i cytosolowe zmiany jonowe są integralnymi etapami kaskady sygnalizacyjnej zapoczątkowanej, gdy czynniki wzrostu wiążą się z ich receptorami, postawiliśmy hipotezę, że indukowane przez MAC odwracalne zmiany przepuszczalności błony mogą stymulować proliferację komórek. Używając oczyszczonych końcowych składników dopełniacza udokumentowaliśmy mitogenne działani...

Nieprawidłowy łańcuch alfa 2 w kolagenie typu I od pacjenta z postacią osteogenezy imperfecta.

Fibroblasty skóry w hodowli od kobiety o łagodnej do umiarkowanej postaci niedoskonałości osteogenezy syntetyzują dwa rodzaje prokolagenu typu alfa 2 typu I. Jeden łańcuch jest normalny. Nieprawidłowy łańcuch ma nieco szybszą ruchliwość niż normalna podczas elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu. Analiza peptydów z bromocyjanem łańcucha pro-alfa, łańcucha alfa i ssaczy produktów rozszczepiania kolagenazy w łańcuchach pro-alfa i alfa wskazuje, że nieprawidłowość jest ograniczona do fragmentu CB4 alfa (I) i jest zgodna z utratą krótkiego odcinka potrójnego spiral...

Najnowsze zdjęcia w galerii e-gastrolog:

Oczyszczanie i częściowe sekwencjonowanie autoantygenu RA33 wykazuje, że jest on nie do odróżnienia od białka A2 heterogennego kompleksu jądrowego rybonukleoproteiny.

RA33 jest autoantygenem jądrowym o pozornej masie cząsteczkowej 33 kD. Autoprzeciwciała przeciwko RA33 występują w około 30% surowic od pacjentów z RA, ale tylko sporadycznie w surowicach od pacjentów z innymi chorobami tkanki łącznej. Aby scharakteryzować RA33, antygen oczyszczono z ekstraktów jądrowych komórek HeLa do uzyskania ponad 90% homogenności za pomocą chromatografii powinowactwa na heparynie-Sepharozie i przez chromatoogniskowanie. Analiza sekwencji pięciu peptydów tryptycznych ujawniła, że ich sekwencje odpowiadają odpowiadającym sekwencjom białka A2 heterogennego kompleksu nukleon...

Zydowudyna wywołuje molekularne, biochemiczne i ultrastrukturalne zmiany mitochondriów mięśni szkieletowych szczura.

Zydowudyna (AZT) hamuje replikację HIV-1 w AIDS. Ograniczającym efektem ubocznym jest indukowana przez AZT toksyczna miopatia. Zmiany molekularne szczurzego modelu indukowanej przez AZT toksycznej miopatii in vivo pomogły zdefiniować patogenetyczne molekularne, biochemiczne i ultrastrukturalne toksyczne zdarzenia w mięśniach szkieletowych oraz potwierdzone wyniki kliniczne i in vitro. Po 35 dniach leczenia AZT, selektywne zmiany w mięśniach poprzecznie prążkowanych zlokalizowane były ultrastrukturalnie do mitochondriów i obejmowały obrzęk, uszkodzenie cristae i mieliny. Zmniejszone mitochondrialne DNA ...

Lokalizacja regionów wiążących mysiego monoklonalnego przeciwciała anty-czynnik VIII i ludzkiego alloprzeciwciała czynnika VIII, które hamują aktywność prokoagulacyjną czynnika VIII, do reszt aminokwasowych treoniny351-seryny 365 czynnika VIII

Zlokalizowaliśmy region wiążący wcześniej opisanego przeciwciała monoklonalnego anty-czynnik VIII (FVIII) hamującego (C5) do reszt aminokwasowych Thr351-Ser365 z 54-kD wytworzonego trombiny fragmentu ciężkiego łańcucha FVIII. Syntetyczne peptydy FVIII badano pod kątem zdolności do konkurencyjnego hamowania wiązania C5 do FVIII w systemie ELISA. Syntetyczny peptyd FVIII Thr351-Ser365 blokował wiązanie C5 z FVIII w sposób zależny od dawki w tym układzie. Dwa inne syntetyczne peptydy FVIII, Asn340-Glu354 i Glu342-Asp356, które częściowo zachodziły na Thr351-Ser365, również blokowały wiązanie ...

Wada epitopu receptora dopełniacza 3 u pacjenta z układowym toczniem rumieniowatym.

Receptor 3 receptora dopełniacza (CR3) ulega ekspresji na komórkach układu siateczkowo-śródbłonkowego i bierze udział w usuwaniu kompleksów immunologicznych. W tym artykule opisano pacjenta z niedoborem miejsca wiązania C3bi tego receptora. Klinicznie pacjent ten przejawiał głównie skórne objawy tocznia rumieniowatego układowego z zapaleniem naczyń i zapaleniem paniculitis. Niedobór epitopu CR3 wykazano za pomocą cytometrii przepływowej. Funkcjonalne znaczenie tej wady wykazano w próbie rozetowej z erytrocytami obciążonymi C3bi. Stwierdzono, że wiązanie C3bi było znacznie zmniejszone. Ponadto...

Biosyntetyczne i strukturalne badania białek o ciężkim łańcuchu

Nowe białko o ciężkim łańcuchu (? HCD-JM) zostało scharakteryzowane za pomocą kryteriów antygenowych i strukturalnych. Białko należy do podklasy IgG3 i jest blisko spokrewnione z fragmentem Fc immunoglobulin G3. Dominującym N-końcowym aminokwasem tego białka jest kwas glutaminowy w postaci niecyklizowanej, a inny? HCD jest glicyną. Badania N-końcowych peptydów wskazują, że N-końcowa część łańcucha ciężkiego polipeptydu A3 jest nieobecna w JHCD-JM. Wyniki te wykluczają proces normalnej inicjacji ciężkiego łańcucha i dużą delecję regionu Fd jako odpowiedzialnego za te dwa białka ła...

Metaboliczna redukcja chromu przez makrofagi pęcherzykowe i jego związki z dymem papierosowym.

Płucne pęcherzykowe makrofagi (PAM), uzyskane przez płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe od 47 osób, zmniejszyły sześciowartościowy chrom [Cr (VI)] i zmniejszyły jego mutagenność. Ich specyficzna aktywność - w większości zależna od mechanizmów cytozolowych, katalizowanych przez enzymy - była znacznie wyższa niż w odpowiednich preparatach populacji komórek mieszanych z ludzkiego obwodowego miąższu płuc lub drzewa oskrzelowego, lub ze szczurzego płuca lub wątroby. Przy równoważnej liczbie PAM, redukcja Cr (VI), całkowite białko i niektóre aktywności oksydoreduktazy były znacząco zwiększo...

Wykrywanie częstego polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych w locus ludzkiego beta receptora antygenowego komórek T. Potencjalne narzędzie diagnostyczne.

Nieprawidłowa funkcja limfocytów T jest cechą spektrum dziedzicznych i nabytych chorób. Wykryliśmy częsty polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych w locus ludzkiego łańcucha beta receptora komórek T, który może pomóc w analizie tych zaburzeń. Badanie panelu 18 normalnych osobników, testujących obecność polimorfizmu, wykazało, że stanowi on 36% alleli w tej grupie. Biorąc pod uwagę fakt, że locus łańcucha beta receptora komórek T został zmapowany do chromosomu 7 i że ataksja teleangiektazja (AT) choroby jest związana zarówno z nieprawidłową funkcją limfocytów T, jak i z niepr...

Rola pleocytozy płynu mózgowo-rdzeniowego i kapsułki Haemophilus influenzae typu b na przepuszczalność bariery krew-mózg podczas doświadczalnego zapalenia opon mózgowych u szczurów.

Wpływ leukocytów i kapsułki Haemophilus influenzae typu b (Hib) na przepuszczalność bariery krew-mózg (BBBP) na krążącą albuminę 125I u szczurów normalnych i leukopenicznych oceniano po wewnątrzczaszkowym zaszczepieniu kapsułkowanych (Rd- / b + / 02) lub bez kapsułek (Rd). - / b- / 02) izogeniczne szczepy Hib. Zarówno zwierzęta normalne jak i leukopeniczne zwiększyły BBBP 18 godz. Po inokulacji, przy normalnych szczurach wykazujących znacząco zwiększone BBBP po prowokacji zakapsułowanym szczepem. Pomimo pleocytozy płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) u zdrowych szczurów stężenie bakterii w CSF...

Trijodotyronina wzmaga odpowiedź nerek na aldosteron w kanalikach zbierających królika.

Ponieważ zaobserwowano, że hormony tarczycy i mineralokortykoidy stymulują nerkową Na-K-ATPazę w podobnych miejscach iz podobnymi przebiegami czasowymi, to badanie rozpoczęto w celu oceny, czy aldosteron jest zaangażowany w stymulację Na-K-ATPazy obserwowaną w zbieraniu kanalików 3 godziny po podanie trójjodotyroniny (T3) królikom poddanym tarczycy (TX). Wyniki wskazują, że: Poziom aldosteronu w osoczu znacznie się zmniejszył u królików TX, ale nie został przywrócony 3 godziny po wstrzyknięciu T3; Wczesna stymulacja Na-K-ATPazy przez T3 została zniesiona, gdy poziom aldosteronu w osoczu został...

Immunizacja antygenem powierzchniowym merozoitu Plasmodium falciparum indukuje częściową odporność u małp.

Małpy Saimiri immunizowane polipeptydem merozoitu Plasmodium falciparum o masie cząsteczkowej 41 kD są odporne na infekcję prowokowaną krwią, która indukuje piorunującą infekcję u kontrolnych małp. Surowice immunizowanych małp reagowały, jak pokazano techniką pośredniej immunofluorescencji, z wierzchołkową częścią merozoitów z pięciu izolatów lub klonów P. falciparum. To, czy immunogen był rozpuszczony w niejonowym detergencie (NP-40), czy w dodecylosiarczanie sodu (SDS) miało znaczący wpływ na poziom ochrony u immunizowanych małp. Tak więc małpy immunizowane antygenem rozpuszczonym w ...

Hiperkalcemia wywołana arotynoidem u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Nowy model do badania resorpcji kości in vivo.

Model stymulowanej resorpcji kości opracowano przy użyciu syntetycznego retinoidu u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Retinoidy spowodowały wzrost resorpcji kości i liczbę kręgowych osteoklastów podokostnowych. Wynikowy wzrost stężenia Ca w osoczu można wykorzystać jako łatwo mierzony wskaźnik resorpcji kości. Trzy bisfosfoniany powodowały zależne od dawki zapobieganie i odwracanie hiperkalcemii wywołanej retinoidami. Ich moc była podobna do poprzednio uzyskiwanej przez histomorfometrię. Napromieniowanie (600 rad) szczurów zapobiegło hiperkalcemii, ale nie udało się go odwrócić,...

Cukrzyca i seksualny karłowatość ateliotyczna: badanie porównawcze

Częstość występowania retinopatii cukrzycowej określono u 38 chorych na cukrzycę i 31 seksualnych atelektycznych karłów z niedoborem hormonu wzrostu (HGH). Rozkład wieku i płci był w przybliżeniu taki sam w każdej grupie. Częstość występowania i wzorzec nietolerancji glukozy były podobne u diabetyków i krasnoludów z niedoborem HGH. Większość diabetyków (21 z 38) i niedoborów HGH (26 z 31) wykazywało insulinoopenię po glukozie, mieszane posiłki z wołowiny glukozowej i napar z l-argininy. Mniejsza liczba krasnoludów z niedoborem HGH (5 z 31) i diabetyków (8 z 38) miała prawidłowe lub z...

Podatność in vitro grzybów na zabijanie przez granulocyty obojętnochłonne rozróżnia pierwotną patogenność i oportunizm.

Grzyby chorobotwórcze, zgodnie z ich skłonnością do wywoływania zakażenia pozornie normalnych osobników, mogą być zgrupowane w główne patogeny (np. Kokcydioidy, histoplazma, parakokcydioidy, blastomyki i sporothrix) lub oportuny (np. Candida, Mucoraceae, Aspergillus spp., Petriellidium i Trichosporon). Nie istnieje jednak żadna jednocząca koncepcja wyjaśniająca różnicę między zjadliwością dwóch kategorii grzybów. Wcześniej spekulowaliśmy, że neutrofile są wspólnym mianownikiem wysokiej naturalnej odporności na grzyby oportunistyczne. W związku z tym porównaliśmy podatność na zabijan...

Izolacja i częściowa charakterystyka białek wiążących Fc gamma ludzkich leukocytów.

Wyizolowaliśmy i częściowo scharakteryzowaliśmy trzy makrocząsteczki wiążące Fc z ludzkich leukocytów. Jednojądrzaste komórki od zdrowych osób i od pięciu pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową i neutrofilami od zdrowych dawców były znakowane izotopowo za pomocą 125I i laktoperoksydazy. Po solubilizacji komórek przez detergent makrocząsteczki wiążące gamma Fc oczyszczono za pomocą powtarzalnej chromatografii powinowactwa w różnych warunkach i analizowano za pomocą elektroforezy na żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS). Wyizolowano trzy znakowane radioaktywnie m...

Potencjacja funkcji fragmentów czynnika Hagemana przez kininogen o wysokiej masie cząsteczkowej.

Pacjenci, u których nie ma kininogenu o wysokiej masie cząsteczkowej (HMW), wykazują głębokie nieprawidłowości zależnych od czynnika Hagemana dróg krzepnięcia, tworzenia kininy i fibrynolizy. Zbadano zdolność kininogenu HMW do wzmacniania aktywacji fragmentów czynnika Hageman (HFf) w prekalikreinie i czynniku XI w osoczu. HFf tylko częściowo przekształcił czynnik XI w XIa i prekallikreinę w kallikreinę w osoczu z niedoborem kininogenu HMW (cecha Williamsa), podczas gdy zwiększona aktywacja czynnika XI i prekalikreiny przez HFf nastąpiła po odtworzeniu z kininogenu HMW. W układzie wykorzystują...

Zmniejszono krążące komórki pochodzące z grasicy za pomocą receptorów dla części Fc immunoglobuliny G w toczniu rumieniowatym układowym.

Komórki pochodzące z grasicy z receptorami dla części Fc immunoglobuliny G (limfocyty Fcgamma +) okazały się ostatnio mieć funkcję supresorową, funkcję zmniejszoną w układowym toczniu rumieniowatym (SLE). Komórki T Fcgamma + zostały znacząco zmniejszone u 21 nieleczonych pacjentów z SLE, szczególnie u 7 pacjentów z aktywną chorobą. Większość komórek T Fcgamma + rozdzielono subpopulacją komórek T o niskim powinowactwie do erytrocytów owcy. Zmniejszenie tej subpopulacji zależało od zmniejszenia liczby komórek Fcgamma +. Komórki nie-T z receptorami Fcgamma również były zmniejszone u pa...

Nieprawidłowy metabolizm miedzi i niedobór aktywności oksydazy lizylowej w dziedzicznym zaburzeniu tkanki łącznej.

Nieprawidłowości biochemiczne badano u dwóch braci z przeponami pęcherza moczowego, przepuklin pachwinowych, nieznacznym zwiotczeniem skóry i nadwzrocznością oraz nieprawidłowościami szkieletowymi, w tym egzostozami potylicy. Aktywność oksydazy lizylowej była niska w pożywce hodowanych fibroblastów skóry, czemu towarzyszy zmniejszona konwersja nowo syntezowanego kolagenu do postaci rozpuszczalnej. Stężenie miedzi było znacznie podwyższone w hodowanych fibroblastach skóry, ale zmniejszyło się w surowicy i włosach. Poziomy cerulophasmin w surowicy również były niskie. Uważa się, że zmniejs...

Tłumaczenie i stabilność mRNA ludzkiej globiny w oocytach Xenopus.

Ludzki matrycowy RNA (mRNA) przygotowany z komórek erytroidalnych pacjentów z niedokrwistością sierpowatych komórek został przetłumaczony na oocyty Xenopus laevis. Dodanie heminy do wstrzykniętego mRNA powoduje wzrost całkowitej syntezy globiny i stosunek alfa do syntezy beta-globiny (stosunek alfa / beta) do zbliżenia się do jedności. Aby określić wpływ długości segmentu poli (A) na stabilność mRNA ludzkiej globiny, mRNA 10S globiny frakcjonowano na frakcje poli (A) -pochodne przez chromatografię kolumnową oligo (dT) -celelozy. Gdy oocyty są wstrzykiwane w każdą z tych frakcji, translacja mR...

Autoprzeciwciało z komórek T antyhelpera w nabytej agammaglobulinemii.

Pacjent z nabytą agammaglobulinemią miał antyhelpowy czynnik limfocytów T, który został zidentyfikowany jako immunoglobulina z klasy IgG. Czynnik specyficznie związany z podzbiorem komórki TH2-T i, w obecności dopełniacza, zlikwidował efekt pomocniczy normalnych limfocytów T. Przeciwciało limfocytów T antyhelper poprzedziło kilkuletnie pojawienie się limfocytów T supresyjnych TH2 + Ia +, w którym to czasie przebieg kliniczny gwałtownie się pogarszał. Plazmafereza skutkowała limfocytozą i ponownym pojawieniem się funkcjonalnie nienaruszonej populacji limfocytów T pomocniczych. Nie wpłynęło...

Hemoglobiny McKees Rocks (alpha2beta2145Tyr prowadzi do Term). Ludzka "nonsensowna" mutacja prowadząca do skróconego łańcucha beta.

Pierwszym przykładem przedwczesnego zakończenia łańcucha polipeptydowego u człowieka wydają się być Hb McKees Rocks, a beta145 Tyr prowadzi do Term, odkrytego u policystycznych członków rasy kaukaskiej. Mutacja punktowa najwyraźniej wystąpiła w kodonie dla Tyr beta145 z UAU do kodonu "nonsensownego", UAA lub UAG, skutkując skróconym łańcuchem polipeptydowym z Lys 144 jako jego aminokwasem na końcu karboksylowym. Dowodem tego strukturalnego wniosku jest brak peptydu tryptycznego betaT-15 z "odcisków palców" nieprawidłowego łańcucha beta, odkrycie C-końcowego Lys oraz podobi...

Przechowywanie płytek krwi powoduje redystrybucję cząsteczek glikoproteiny Ib. Dowody na dużą pulę wewnątrz płytkową glikoproteiny Ib.

Glikoproteina błony komórkowej (GP) Ib zawiera receptor dla czynnika von Willebranda i trombiny. Jego proteolityczny fragment, glikokalicyna, krąży w normalnym osoczu. W tym badaniu przechowywanie koncentratów płytek przez 5 dni spowodowało zwiększenie glikokalicyny w osoczu o 221% (1,3-krotność całkowitej ilości glikokalicyny obecnej na powierzchni wszystkich płytek krwi), ogólny wzrost GPIb na powierzchni płytek o 8% i pojawienie się powierzchniowej subpopulacji płytek ujemnej pod względem GPIb. Całkowita zawartość GPIb w płytkach krwi w świeżo przemytych płytkach, określona za pomocą el...

Hiperoksyczne osłabienie skurczu oskrzeli wywołanego wysiłkiem u astmatyków.

Aby zbadać mechanizm wywołanego wysiłkiem skurczu oskrzeli, zmierzyliśmy przewodnictwo dróg oddechowych przed i po wysiłku u 7 zdrowych osób zdrowych, 12 osób z astmą i nienaruszonymi tętnicami szyjnymi oraz 5 osób z astmą oskrzelową, u których wykonano obustronną resekcję tętnicy szyjnej. Badani oddychali powietrzem lub tlenem (losowo przydzielani) podczas ćwiczeń z ergometrem cyklu. Po wysiłku bronchodilacja była normalnym zjawiskiem u osób zdrowych, podczas gdy skurcz oskrzeli po wysiłku wystąpił u wszystkich astmatyków, którzy oddychali powietrzem podczas ćwiczeń. Oddech tlenowy podc...

Molekularna charakterystyka somatycznie zmutowanego przeciwciała anty-DNA niosącego dwa ogólnoustrojowe idiotypy tocznia rumieniowatego.

Opisujemy charakterystykę molekularną 2A4, przeciwciała IgG wiążącego DNA, zawierającego idiotypy 3I i F4, które są związane z przeciwciałami anty-DNA w surowicy pacjentów z układowym toczniem rumieniowatym (SLE). Przeciwciało jest wytwarzane przez transformowaną EBV linię komórek B pochodzącą od pacjenta ze szpiczakiem mnogim, którego białko szpiczaka jest również reaktywną immunoglobuliną wiążącą IgG, reaktywną względem 3I, F4, chociaż samo przeciwciało 2A4 samo w sobie nie reprezentuje szpiczaka. białko. Łańcuch ciężki 2A4 jest kodowany przez gen VH4, fuzję genu DD i gen JH6...

Aktywacja transbłonowa za pośrednictwem czynnika płytkowego w ludzkich limfocytach B jest regulowana przez szlak wrażliwy na toksynę krztuśca i cholery.

Czynnik aktywujący płytki krwi (PAF) stymuluje ludzkie limfocyty B, powodując zwiększenie wewnątrzkomórkowego wapnia i uwalnianie fosforanów inozytolu. Ta droga przekazywania sygnału jest zahamowana w obecności krztuśca (PT) lub toksyny cholery (CT). Preinkubacja ludzkich komórek B za pomocą albo toksyny, ale nie ich nieaktywnych podjednostek, przez 3 h blokowała te indukowane PAF odpowiedzi w dwóch limfoblastoidalnych liniach komórkowych. Efekt ten był zależny od czasu, z pewną inhibicją odnotowaną po 30 minutach, ale dopiero po inkubacji wstępnej przez 2-3 godziny osiągnięto maksymalne hamow...

Indukowane przez bradykininę zmiany w obrocie fosfatydyloinozytolem w hodowanych komórkach kanalików brodawkowatych królika.

Królicze komórki brodawkowe zbierające kanaliki nerkowe wyizolowano jako homogenną populację i hodowano w hodowli pierwotnej. Komórki te utrzymywano w pełni zdefiniowanej pożywce dla zahamowania przerostu fibroblastów i dla ułatwienia znakowania endogennych fosfolipidów inozytolu za pomocą mio- [2-3H] inozytolu o wysokiej aktywności specyficznej. Komórki te wykazały morfologię, odpowiedź cyklicznego AMP i opracowanie prostaglandyny E2 (PGE2), zgodnie z poprzednimi opublikowanymi charakterystykami. Gdy komórki znakowane myo [2-3H] inozytolem były stymulowane przez bradykininę w 10 (-7) M, zaobserw...

Angioplastyka balonowa wzmacnia ekspresję receptorów angiotensyny II AT1 w neointimy aorty szczura.

Angiotensyna II jest wazoaktywnym peptydem i może działać jako czynnik wzrostu w komórkach mięśni gładkich naczyń. Eksperymentalne uszkodzenie aorty szczura powoduje szybką migrację przyśrodkowych komórek mięśni gładkich i ich proliferację, co powoduje tworzenie się nowych błon wewnętrznych. Zbadaliśmy, stosując autoradiografię ilościową, ekspresję podtypów receptora angiotensyny II AT1 i AT2 oraz enzymu konwertującego angiotensynę w neointimy powstałej w aorcie piersiowej szczura 15 dni po urazie balonu-cewnika. W przeciwieństwie do normalnej ściany aorty, która zawierała zarówno r...

Interleukina 2 pośredniczy w stymulacji biosyntezy dopełniacza C3 w ludzkich proksymalnych kanalikach nabłonkowych.

Poprzednie raporty sugerowały wytwarzanie składników dopełniacza C4, C2 i czynnika B przez tkankę nerkową. Komórki biorące udział w produkcji dopełniacza nie zostały jednak zidentyfikowane. W tym badaniu eksperymenty z etykietowaniem metabolicznym wykazały, że ludzkie komórki nabłonka kanalików proksymalnych (PTEC) syntetyzują prekursor o masie cząsteczkowej 180 kD, który jest wydzielany po cięciu proteolitycznym w dwułańcuchową cząsteczkę połączoną dwusiarczkiem, występującą w osoczu. C3 występujące w supernatantach hodowli PTEC było funkcjonalnie aktywne, jednak podczas okresu hod...

Terapeutyczne stężenia glukokortykoidów hamują aktywność przeciwbakteryjną człowieka

Poprzez eksponowanie ludzkich makrofagów krwiopochodnych i makrofagów pęcherzykowych in vitro na deksametazon, wykazaliśmy w tych badaniach, że glukokortykoidy znacząco hamują aktywność przeciwdrobnoustrojową makrofagów, ale nie aktywują makrofagów przez limfokiny. Już tylko 2,5 X 10 (-8) mol / litr deksametazonu zapobiegło makrofagom zahamowania kiełkowania zarodników Aspergillus lub eliminacji połkniętych bakterii, takich jak Listeria, Nocardia lub Salmonella. Uszkodzenie funkcji makrofagów było hamowane przez progesteron i wydawało się, że jest zależne od receptora. Zgodnie z obserwacjami...

Wykorzystanie hodowanych ludzkich komórek limfoidalnych do wykrywania uczulenia humoralnego u potencjalnych biorców przeszczepów nerek.

Potencjalni biorcy przeszczepów nerki byli testowani pod kątem limfocytotoksyczności; z nich wybraliśmy 102 surowice pozbawione przeciwciał cytotoksycznych przeciwko limfocytom obwodowym z co najmniej 80 niespokrewnionych osób. W celu wykrycia uczulenia humoralnego, poddaliśmy je reakcji z 17 hodowanymi ludzkimi limfocytowymi liniami komórkowymi mającymi różne fenotypy HL-A. Przeciwciała cytotoksyczne reagujące z tymi hodowanymi komórkami zostały teraz wykryte w niektórych surowicach. Przeciwciała te nie były skierowane przeciwko antygenom HL-A, ale pośredniczyły w lizie docelowych komórek w obe...

Zależność między fenotypem apolipoproteiny (a), stężeniem lipoproteiny (a) w osoczu i funkcją receptora lipoprotein o małej gęstości w rodzinnej hipercholesterolemii z powodu mutacji pro664 ---- leu w genie receptora LDL.

W dużej grupie 66 osób 22 zidentyfikowano jako heterozygotyczne, a 3 jako homozygotyczne pod względem mutacji (pro664 ---- leu) w genie receptora LDL, co prowadzi do rodzinnej hipercholesterolemii (FH). Wszystkie heterozygoty miały podwyższony poziom całkowitego cholesterolu w osoczu i cholesterolu lipoprotein niskiej gęstości, ale były wyjątkowo wolne od przedwczesnej choroby wieńcowej. Oznaczenie stężenia apolipoproteiny (a) (apo (a)) i lipoproteiny (a) (Lp (a)) w osoczu wykazało, że w wielu przypadkach u osób z różnymi fenotypami apo (a) nie było różnicy w Lp w osoczu (a) stężenie pomiędzy...

Włókna pośrednie w złośliwych czerniakach. Identyfikacja i zastosowanie jako markera w patologii chirurgicznej.

Włókna o średniej wielkości zostały zbadane w ludzkich czerniakach złośliwych i prawidłowych melanocytach za pomocą mikroskopii immunofluorescencyjnej z przeciwciałami skierowanymi przeciwko keratynie, wimentynie, desminie, białku neurofilamentu i białku włókna glejowego. Zarówno ludzkie guzy melanotyczne, jak i amelanotyczne oraz przerzuty nowotworowe, jak również normalne melanocyty w ludzkiej skórze i oku szczura zawierają wyłącznie pośrednie włókienka typu wimentyny. Nie zaobserwowano reakcji z przeciwciałami przeciwko keratynie, desminie, neurofilamentom lub włóknom glejowym. Te ostat...

Regulacja tworzenia hemoglobiny AIc w ludzkich erytrocytach in vitro. Wpływ czynników fizjologicznych innych niż glukoza.

Tworzenie się hemoglobiny AIc badano w nienaruszonym ludzkim erytrocytach in vitro. Opracowano zadowalające metody utrzymywania erytrocytów w warunkach fizjologicznych przez ponad 8 dni z hemolizą poniżej 10%. Poziom hemoglobiny AIc oznaczano chromatograficznie na hemolizatach erytrocytów po usunięciu odwracalnych składników przez inkubację przez 6 hw 37 stopniach C. Stężenie hemoglobiny AIc wzrastało liniowo z czasem podczas 8 d inkubacji. Szybkość tworzenia hemoglobiny AIc wzrastała liniowo wraz ze wzrostem stężenia glukozy z 40 do 1000 mg / dl. Deoksyhemoglobina była glikozylowana dwukrotnie sz...

Transport potasu przez izolowaną perfundowaną nerkę.

Nerki nerki perfundowane poza ciałem sztucznym medium są w stanie zwiększyć ich frakcyjne wydzielanie potasu w odpowiedzi na wzrost stężenia potasu w pożywce, ale nigdy nie wykazują wydzielania netto potasu. Przeciwnie, izolowane perfundowane nerki od chronicznie obciążonych potasem szczurów regularnie wydzielają potas w nadmiarze względem przefiltrowanej ilości. Ouabain całkowicie blokuje wydzielanie potasu przez te wyizolowane nerki, co sugeruje, że Na-K-ATPaza pośredniczy w wydzielaniu potasu przez szczury przystosowane do potasu. Ani deprywacja sodu, wstępne traktowanie deoksykortykosteronem, a...

Szlaki przetwarzania prekursora gastryny w błonie śluzowej szczura.

Prekursor gastryny hormonu stymulującego wydzielanie kwasu powoduje powstanie wielu peptydów różniących się znacznie pod względem aktywności biologicznej, ale odpowiednie szlaki biosyntezy są słabo poznane. Zastosowaliśmy przeciwciała przeciwko amidowanym gastrynom, gastrynom z końcowymi C-końcowymi gastrynami glicynowymi (Gly) z hydroksyglicyną na końcu COOH (GlyOH) i końcem COOH progastryny, do immunoprecypitacji peptydów znakowanych [35S] siarczanem lub [3H] tyrozyny podczas inkubacji śluzówki antralnej szczura in vitro. Wyznakowaną progastrynę wykrywano po 30 minutach ciągłej inkubacji z ...

Rodzinna kardiomiopatia przerostowa jest genetycznie heterogenną chorobą.

Wykazujemy, że rodzinna przerostowa kardiomiopatia (FHC), autosomalne dominujące zaburzenie mięśnia sercowego, jest genetycznie heterogenną chorobą. Miejsce odpowiedzialne za FHC u członków jednego dużego pokolenia zostało niedawno zmapowane na chromosomie 14q11-12 (FHC-1). Scharakteryzowaliśmy trzy dodatkowe niespokrewnione rodziny, w których gen FHC oddziela się jako autosomalna dominująca cecha, aby określić, czy te loci chorobowe są również mapowane na FHC-1. Wszyscy członkowie rodziny zostali przebadani klinicznie na podstawie badania fizykalnego, elektrokardiogramu i dwuwymiarowej echokardi...

Zmiana reprezentacji podzbiorów komórek T CD8 naiwnych i pamięciowych u dzieci zakażonych wirusem HIV.

Komórki T CD8 są podzielone na podzbiory naiwne i pamięciowe, zależnie od funkcji i fenotypu. U dzieci z ujemnym wynikiem HIV podzbiór naiwny występuje na wysokich częstotliwościach, podczas gdy komórki pamięci są praktycznie nieobecne. Wcześniejsze badania wykazały, że całkowita liczba komórek T CD8 nie zmniejsza się u dzieci zakażonych wirusem HIV. W badaniach używamy wieloparametrowej cytometrii przepływowej do rozróżniania naiwnych komórek T pamięci CD8 w oparciu o ekspresję CD11a, CD45RA i CD62L. Dzięki tej metodologii pokazujemy, że w populacji komórek T CD8 podzbiór naiwny znaczą...

Angiotensynogen jako czynnik ryzyka pierwotnego nadciśnienia tętniczego w Japonii.

Popularny molekularny wariant angiotensynogenu (AGT), prekursora silnego wazoaktywnego hormonu angiotensyny II, został obciążony jako marker genetycznej predyspozycji do nadciśnienia tętniczego u osób rasy kaukaskiej (Jeunemaitre, X., F. Soubrier, YV Kotelevtsev, RP Lifton , CS Williams, A. Charru, SC Hunt, PN Hopkins, RR Williams, JM Lalouel i P. Corvol., 1992. Celi 71: 169-180). Obecnie pokazujemy, że ten sam wariant, T235, jest związany z nadciśnieniem tętniczym pierwotnym u japońskich pacjentów. Obserwacja tego związku w odrębnej, homogenicznej populacji etnicznej dodatkowo potwierdza zaangażowani...

Wyrażanie genu interleukiny 1 zależnej od cyklu komórkowego przez hodowane kłębkowe komórki mezangialne.

Glomerularna mezangialna komórka (MC) - pochodna IL-1 może być ważnym czynnikiem w rozwoju hiperkomórkowości i stwardnienia charakterystycznych dla wielu postaci kłębuszkowego zapalenia nerek. Aby zdefiniować regulację syntezy IL-1 przez ludzkie MC, przeprowadzono analizę Northern blot przy użyciu specyficznych sond do monocytowego IL-1 alfa i beta mRNA. Proliferujący MC ulegał ekspresji mRNA zarówno dla IL-1 alfa, jak i beta, podczas gdy nieproliferujący MC nie zawierał wykrywalnego mRNA IL-1. Zsynchronizowany MC eksprymował mRNA IL-1 alfa i beta w ciągu 2 godzin stymulacji surowicą. Ten efekt s...

Zespół gołego limfocyta. Konsekwencje nieobecności głównej ekspresji antygenu zgodności tkankowej klasy II dla różnicowania i funkcji limfocytów B.

Nagi zespół limfatyczny jest rzadkim połączonym zaburzeniem niedoboru odporności związanym z nieobecnością antygenów głównych zgodności tkankowej klasy I i / lub klasy II (MHC). Chociaż stwierdzono, że niedobór odporności jest konsekwencją nieuporządkowanych interakcji ograniczonych przez MHC między innymi normalnymi komórkami, nie przeprowadzono rygorystycznych analiz biologicznych zdolności i różnicowania limfocytów B z niedoborem antygenów MHC klasy II. Zbadaliśmy cechy fenotypowe i funkcjonalne komórek B z nieobecnymi antygenami MHC klasy II. Nasze dane pokazują, że te komórki B są...

Retargetowanie komórek przez bispecyficzne przeciwciała monoklonalne. Dowód pominięcia wrażliwości śródpiersia na lizę komórek w czerniaku ludzkim.

Nieleczność wewnątrzmaciczna pod względem podatności na lizę cytotoksycznych limfocytów T (CTL) stanowi główną przeszkodę w immunoterapii adoptywnej nowotworów. Aby pokonać heterogenność obserwowaną pod względem podatności komórek docelowych na lizę komórkową, w tym badaniu wykorzystano dwa oczyszczone bispecyficzne przeciwciała monoklonalne (bsmAbs), które rozpoznają cząsteczki ekspresjonowane przez cytotoksyczne komórki efektorowe (cząsteczki receptora CD3 i IgG Fc), jak również jako jeden wysokocząsteczkowy antygen związany z czerniakiem (HMW-MAA). Zdolność tych odczynników do w...

Immunoglobulina G jest białkiem wydzielającym granulki alfa w postaci płytek krwi.

Wiadomo od 27 lat, że płytki krwi zawierają IgG, ale jego subkomórkowe umiejscowienie i znaczenie nigdy nie zostały jednoznacznie określone. W tych badaniach ustalono lokalizację IgG w ludzkich płytkach krwi za pomocą technik immunocytochemicznych oraz odpowiedzi IgG płytek na czynniki, które powodują wydzielanie płytek krwi. Stosując zamrożone cienkie skrawki płytek i immunogolkową sondę IgG umiejscowiono wewnątrz granulek alfa. Stymulacja trombiną powodowała równoległe wydzielanie IgG płytek krwi i dwóch znanych białek alfa-granulek, czynnika płytkowego 4 i beta-tromboglobuliny, począws...

Lokalizacja miejsca wiązania tkankowego aktywatora plazminogenu z fibryną.

Funkcjonalnie aktywne łańcuchy A i B oddzielono od dwułańcuchowej postaci rekombinowanego tkankowego aktywatora plazminogenu po łagodnej redukcji i alkilowaniu. Stwierdzono, że łańcuch A jest odpowiedzialny za wiązanie z lizyną-Sepharozą lub fibryną, a łańcuch B zawierał katalityczną aktywność tkankowego typu aktywatora plazminogenu. Znaczna redukcja dwułańcuchowego tkankowego aktywatora plazminogenu zniszczyła jednak zarówno aktywność wiążącą, jak i katalityczną. Fragment termolityczny, Fr. 1, z tkankowego aktywatora plazminogenu, który zawierał czynnik wzrostu i dwa segmenty kringle ...

Wydzielanie przez glukagonoma możliwego prekursora glukagonu.

Pięciu pacjentów z glukagonami miało zwiększone poziomy immunoreaktywności całkowitego glukagonu w osoczu. Filtracje żelowe tych próbek osocza na kolumnach Bio-Gel P30 wykazały, że większość immunoreaktywności wyeluowała w frakcjach 3500- (prawdziwego glukagonu) i 9000-daltonów. Po podaniu efektorów komórek alfa obserwowano zmiany w całkowitej immunoreaktywności glukagonu, które w pierwszym rzędzie odpowiadały 3500 daltonom, ale nastąpiły również zmiany w ugrupowaniu 9000-daltonów. Żywieniowe osocze z guzów dwóch pacjentów zawierało podwyższone stężenia immunoreaktywności glukago...

Adenowirusowa ekspresja bramkowanego napięciem kanału potasowego in vitro (szczurzych miocytów sercowych) i in vivo (wątroba szczura). Nowa strategia modyfikacji pobudliwości.

Pobudliwość zależy przede wszystkim od dopełnienia kanałów jonowych w błonie komórkowej, które kształtują kontur potencjału czynnościowego. Aby zmodyfikować pobudliwość poprzez transfer genów, stworzyliśmy rekombinowany adenowirus zaprojektowany do nadekspresji kanału potasowego Drosophila Shaker (AdShK). In vitro, wiele rodzajów komórek ssaków zakażonych AdShK wykazało silną ekspresję egzogennego kanału. Spontaniczne potencjały czynnościowe zarejestrowane z miocytów sercowych w hodowli pierwotnej zostały skrócone w porównaniu z nieinfekowanymi miocytami. Wewnątrznaczyniowy wlew AdS...

Wrodzona wada ludzkiej tyreoglobuliny z powodu niskiej ekspresji specyficznego dla tarczycy czynnika transkrypcyjnego TTF-1.

TTF-1 i Pax-8 są swoistymi dla tarczycy czynnikami transkrypcyjnymi, odpowiednio z genów homeo i sparowanych, odpowiedzialnych za rozwój tarczycy oraz ekspresję genu tyreoglobuliny i genu tyropotoksydazy. Jednakże, TTF-1 i Pax-8 preferencyjnie wiążą się odpowiednio z promotorami tyreoglobuliny i promotora tyroeroksydazy. Tutaj badaliśmy pacjenta z wadliwą syntezą tyreoglobuliny. MRNA tyreoglobuliny stwierdzono na bardzo niskich poziomach, podczas gdy stwierdzono, że mRNA dla tloperoksydazy jest bardziej obfite w porównaniu z tkanką kontrolną. Niski poziom mRNA tyreoglobuliny jest spowodowany przez de...

Grasica w miastenii gravis. Izolacja linii limfocytów T specyficznych dla nikotynowego receptora acetylocholiny z grasicy u pacjentów z miastenią.

Uważa się, że grasica odgrywa kluczową rolę w patogenezie miastenii rzekomej (MG). Zgodnie z poprzednią hipotezą, MG jest inicjowana w obrębie grasicy przez immunogenną prezentację lokalnie wytwarzanego nikotynowego receptora acetylocholinowego (AChR) potencjalnie autoimmunologicznym komórkom T. Dane 10 kolejnych pacjentów MG wykazują dwie krytyczne cechy grasicy MG, które wspierają koncepcję intratymicznej aktywacji autoreaktywnych limfocytów specyficznych dla AChR. Morfologicznie grasica wykazała hiperplazję limfocytarną w dziewięciu przypadkach i łagodny grasiczak w jednym przypadku. Najważ...

Mutacja mutacji w kodonie 188 ludzkiego genu lipazy lipoproteinowej jest częstą przyczyną niedoboru lipazy lipoproteinowej u osób o różnych przodkach.

Lipaza lipoproteinowa (LPL) odgrywa kluczową rolę w regulacji metabolizmu lipoprotein poprzez hydrolizę rdzeniowych triglicerydów krążącej chylomikronów i VLDL. Komplementarne klony DNA dla ludzkiej, bydlęcej, mysiej i świnki morskiej zostały niedawno wyizolowane i wiadomo, że organizacja ludzkiego genu LPL zawiera 10 eksonów obejmujących około 30 kb. Podajemy podobną mutację na 21 allelach z 13 niepowiązanych probandów z niedoborem LPL pochodzenia francuskiego, kanadyjskiego, angielskiego, polskiego, niemieckiego, holenderskiego i wschodnioindyjskiego. Pokazujemy, że identyczna mutacja missense ...

Dowody na mechanizm humorystyczny w Tom Expansion Natriuresis

Rola mechanizmu humoralnego w natriurezie indukowanym przez ekspansję objętościową oceniano za pomocą wyizolowanej nerki psa perfundowanej przez drugiego psa, który był wcześniej traktowany octanem dezoksykortykosteronu (DOCA). Ekspansja psa perfuzyjnego z wyrównaną objętością krwi ze zbiornika, skutkowała wzrostem UNAV (wydalanie sodu) z 153,6? 27,9 (sem) do 345,5 ? 57,8? Eq / min, P <0,001. FEna (frakcjonowane wydalanie sodu) wzrosła z 3,4-0,6 do 8,1 ? 1,2%, P <0,01. Natriurezę występowało w obliczu istotnego zmniejszenia Cin, RBF i ciśnienia tętniczego nerkowego i przy braku jakiejkolwie...

Protoporfiria erytropoetyczna. Fotoaktywacja układu dopełniacza.

Układ dopełniacza analizowano u 14 bezobjawowych pacjentów z protoporfirią erytropoetyczną. W większości badanych surowic poziomy składników dopełniacza C1, C4, C2 i C3 mieściły się w zakresie prawidłowym. Po napromieniowaniu próbek surowicy in vitro promieniowaniem ultrafioletowym (330-460 nm) zaobserwowano wyraźny spadek całkowitej aktywności hemolitycznej, któremu towarzyszyła redukcja poziomów C1, C4, C2 i C3. Utratę całkowitej aktywności hemolitycznej można bezpośrednio powiązać z poziomami protoporfiryny (PP), a podobne zmiany można uzyskać w normalnej surowicy po dodaniu PP po na...

Ludzki rekombinowany czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów i makrofagów oraz interleukina 3 powodują uwalnianie histaminy przez bazofil.

Wykazano, że czynniki uwalniające histaminę (HRF) są uwalniane z różnych ludzkich komórek, w tym limfocytów T i makrofagów pęcherzykowych. Rozważaliśmy możliwość, że znane cytokiny mogą posiadać taką aktywność na ludzkich bazofilach i / lub komórkach tucznych, a zatem badano preparaty ludzkiej rekombinowanej IL3, IL4, IL5, czynnika stymulującego kolonię granulocytów (G-CSF) i kolonii granulocytów-makrofagów. -stymulujący czynnik (GM-CSF) na panelu dawców bazofili. IL3 i GM-CSF posiadały znaczącą aktywność uwalniającą histaminę odpowiednio u 8 z 10 i 12 z 14 osobników. W każdym ...

Komplement wywołuje przejściowy wzrost przepuszczalności błony w nieoznaczonych erytrocytach.

Zbadano wpływ niskich stężeń ludzkiej surowicy na erytrocyty owcy wrażliwej na przeciwciała (EA). Donoszono, że ekspozycja na niskie stężenia surowicy indukuje duży lecz przejściowy wzrost przepuszczalności błony tych EA, które nie ulegają lizie. Ta zmiana przepuszczalności błony erytrocytów spowodowała wychwyt netto Na + i spadek w komórce K +, bez wpływu na całkowitą zawartość wewnętrznego kationu. Chociaż ekspozycja na surowicę pozwala również na wychwyt netto większych cząsteczek, takich jak L-glukoza, nie prowadzi to do obrzęku komórek. Eksperymenty z sera genetycznie niedobore...

Pancytopenia jako zaburzenie klonalne multipotencjalnej hematopoetycznej komórki macierzystej.

Hematopoezę badano u 14-letniej dziewczynki, która miała 2-letnią historię stabilnej bezobjawowej pancytopenii i która była również heterozygotyczna w miejscu strukturalnym dla dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej (G-6-PD). Nie było dowodów morfologicznych ani cytogenetycznych na obecność preleukemii ani sugestii anemii Fanconiego. W limfocytach T z owłosionymi erytrocytami skóry i owcy stosunek aktywności G-6-PD A / B wynosił 1: 1. Jednak tylko aktywność typu B stwierdzono w erytrocytach krwi obwodowej, granulocytach i płytkach krwi. Większość erythroid bursts i wszystkie kolonie granulocytó...

Hormon przedarigawkowy zidentyfikowany przez wolne od komórek tłumaczenie matrycowego RNA z hiperplastycznej ludzkiej tkanki przytarczycznej.

Frakcja 8-15S RNA wyizolowana z hiperplastycznej ludzkiej tkanki przytarczyc (pierwotny rozrost komórek głównych) i przeniesiona do pozbawionego komórek ekstraktu z kiełków pszenicy kieruje syntezą białka, które ma wspólne determinanty antygenowe i peptydy tryptyczne z parathormonem i jego wcześniejszym rozpoznany natychmiastowy prekursor, hormon krzepliwości krwi. Ponadto białko zawiera peptydy tryptyczne nie występujące w hormonie oporności i migruje wolniej niż hormon krzepnięcia, zarówno na kwasie mocznikowym, jak i żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu, co wskazuje, że jest on b...

Regulacja C / EBP beta genu alfa czynnika martwicy nowotworów.

Aktywowane makrofagi przyczyniają się do przewlekłego stanu zapalnego poprzez wydzielanie cytokin i proteinaz. Czynnik martwicy nowotworu alfa (TNF alfa) jest szczególnie ważny w tym procesie ze względu na jego zdolność do regulowania innych mediatorów stanu zapalnego w autokrynny i parakrynny sposób. Mechanizm (y) odpowiedzialny za regulację TNF alfa specyficznej dla typu komórek nie jest znany. Prezentujemy dane wykazujące, że ekspresja TNF alfa jest regulowana przez czynnik transkrypcyjny C / EBP beta (NF-IL6). C / EBP beta aktywowało promotor genu TNF alfa w testach kotransfekcji i wiązało się ...